Американский гнилец

АМЕРИКАНСКИЙ ГНИЛЕЦ —Histolysis infecttosa perntciosa larvae (син.: злокачественный гнилец, бранденбургский гнилец) — инфекционная болезнь печатного пчелиного расплода, проявляющаяся летом, реже весной. Возбудитель — спорообразующая     грамположительная  палочка   бацилла ларве   (Вас.  larvae).  Микроб  описал Т. Ф. Уайт  (1907). Установлено, что штаммы бациллы ларве разных стран и континентов обладают одинаковыми антигенными  свойствами. С помощью электронно-микроскопического метода хорошо изучена ультраструктура бациллы ларве (Смирнов и др., 1968). -Установлено, что возбудитель имеет вид палочки (2,5X0,8 мкм). Клеточная стенка пятислойная, толщиной  170 А. Наружный  средний и внутренние осмофнльные слои оболочки имеют толщину 20—25 А, два промежуточных осмофильных слоя — по 40— 50  А.

У бациллы ларве цитоолазматическая мембрана (толщина  70 А) располагается за клеточной стенкой и плотно примыкает к протопласту бактерии, она имеет три слоя. Цитоплазма содержит зернистый компонент — рибосомы — величиной 200 А. Вдоль продольной оси клетки диффузно располагается нуклеоид. Деление бациллы осуществляется с образованием перегородки.

Споры формируются на одном из полюсов клетки, где вначале образуются споровые оболочки, а затем спора. Конец клетки, где залетает спора, несколько утолщается. Свободная спора покрыта широкой осмиофильной оболочкой, к которой плотно прилегает тонкий осмиофильный слой, далее лежит внутренняя оболочка споры — кортекс, за которой следуют стенка, споровая мембрана и цитоплазма (рис. 5).

Споры бациллы ларве устойчивы к физическим и химическим воздействиям, особенно если они заключены в корочковый материал или воск. В высохших корочках они сохраняют вирулентность несколько лет, а в меде — более года. В меде, хранящемся на солнечном свету, они выживают 4—6 нед. Сухие свободные споры солнечный свет убивает за 28—41 ч.

По данным А. М. Смирнова (1968), споры погибают в меде под действием гамма-лучей Со⁶⁰ при суммарной дозе 1,5 мрад, а в воске — при дозе 2,5 мрад, полученных за различный промежуток времени.

В воде при температуре 90 °С они гибнут через 3 ч, а при 95 ° С — через час. При кипячении трупов личинок в воде в течение 1 мин гибнет 80% спор, за 5 мин —99%, а в течение 14 мин — все. В неразведенном кипящем меде споры погибают через 40 мин, а в разведенном равным количеством воды — через 20 мин.

Кипячение воска в открытой посуде вызывало гибель спор лишь на пятый день. При прогревании воска сухим жаром при 140—170 °С споры погибали через 1,5—2 ч, а перегретым водяным паром (127°С) под давлением 1,5 атм. в автоклаве за 2 ч.

Сулема в разведении 1:100 убивает споры через 4—5 дней. 1%-ный раствор перекиси водорода, подкисленной кислотой, убивает споры в корочковом материале за 3 ч, в 1 —2 % -ном растворе бета-пропиолактона — за 20—30 мин.

Споры сохраняют жизнеспособность в сухой почве пасек 228 дней, в сырой — до 19 мес, на поверхности почвы в условиях Таджикистана — 70 дней, на глубине до 5 см —до года, на цветках хлопчатника — до 82 дней.

В. С. Сорокин (1925) сообщил, что в ульях, освободившихся ОТ больных американским гнильцом пчелиных семей и стоявших употребления 15 лет, снова возникло заболевание американским гнильцом при поселении в них пчел.

Особенно длительно сохраняются споры, содержащиеся в высохших личинках, погибших от американского гнильца. В зараженных  сотах споры оставались  вирулентными  в течение 35 лет, на ульях, вощине — 20 лет, в медогонке — 5 лет, меде и перге—1 год (срок наблюдения).

 Патогенность. Бацилла ларве патогенна только для личинок трутней, маток и взрослых пчел. Трутневые и маточные личинки поражаются очень редко. Все породы пчел одинаково восприимчивы к американскому гнильцу.

В. А. Триленко (1975) удалось вызвать гибель кроликов на 5—7 день после внутривенного введения им 3—6 млн. спор ба­циллы ларве, у морских свинок после подкожного введения 3 млн. ; спор смерть наступала на 8—10 сут. При этом из крови больных и внутренних органов павших животных изолирована исходная культура.

Для личинок пчел патогенны только споры этого возбудителя. Для заражения одной личинки необходимо скормить ей не менее 10000 спор в 0,01 мл сиропа. С. Матука (1958) заразил пчелиные семьи вегетативной формой бациллы ларве.

Инфицирование пчелиных личинок происходит до запечатывания ячеек при употреблении контаминированного спорами меда и перги. В течение первых трех дней личинки не заболевают гннльцом, потому что они получают маточное молочко, обладающее  бактерицидными свойствами. В последующие дни не запечатанные личинки не заболевают из-за кислой реакции их кишечного сока и высокой концентрации в кишечнике Сахаров (17 %). После запечатывания сотов личинки пчел не получают корм и живут за счет собственных ресурсов, при этом концентрация инвертированного сахара снижается с 17 до 3—2,5 %. Инкубационный период длится от 2 до 7 дней, поэтому заразившиеся личинки погибают после запечатывания ячеек.

В редких случаях при очень высокой патогенности возбудителя и ослаблении резистентности личинок гибель их может наступить до запечатывания или в стадии куколок в первые 1 — 2 дня развития.

Эпизоотологические  данные. Источником возбудителя американского гнильца являются трупы личинок. В погибшей личинке содержится такое количество спор (1,5— 3 млрд.), которое способно заразить 200 личинок.

Фактором распространения спор внутри семьи служат пчелы, особенно молодые, которые выполняют роль чистильщиц ячеек, приемщиц принесенного нектара и кормилиц личинок. Основным путем распространения болезни на пасеке и за ее пределы служат все объекты, контаминированные спорами: инфицированные ульи, пчеловодный инвентарь, медогонки, соты, вощина, мед, перга, воск, ульевые холстики и наволочки утеплительных подушек и пр.

Фактором распространения возбудителя болезни могут служить мастерские, изготавливающие вощину и воскозаводы, содержащиеся в антисанитарных условиях. Споры американского гнильца могут распространять паразиты и хищники пчел: восковая моль, ветчинный кожеед, уховертки, различные клещи, особенно варроа якобсони, осы, муравья, муха дрозофила, лжескорпиоиы и другие паразиты, а также пчелы-воровки. Замечено, что американским гнильцом чаще поражаются здоровые, сильные пчелиные семьи, склонные к воровству. Они могут заразиться от больных пчелиных семей не только в пределах своей пасеки, но и от соседних пасек, расположенных на расстоянии лёта пчел.

Инфицироваться здоровые пчелы спорами бацилл американского гнильца могут и на цветках, которые посещали пчелы больных семей, а также от объектов внешней среды, контаминированных возбудителем болезни (почва при весенней очистке ульев и пр.).

Распространение американского гнильца возможно и на большие расстояния при пересылке пакетов пчел или целых семей с пасек, неблагополучных по данной болезни. Матки, полученные в пчелиных семьях, больных американским гнильцом, являются спороносителямн ,в течение 28 дней, поэтому пересылка маток тоже может быть причиной распространения возбудителя болезни.

Патогенез. Возбудитель американского гнильца, проникнув через стенку среднего отдела кишечника в гемолимфу, быстро в ней размножается и распространяется в течение 12— 24 ч по организму. Этому благоприятствует метаморфоз личинки в куколку, когда ткани отдельных органов личинки, в том числе и кишечника, подвергаются гистолизу. Микроб выделяет продукты жизнедеятельности — токсины, которые вызывают гибель личинки. В организме личинки отмечаются дегенеративные процессы: в цитоплазме клеток — плазморексис, плазмопикноз, вакуолизация, в ядрах — кариорексис, гиперхроматоз. Дегенеративные изменения наблюдаются и в эноцитах, клетках жирового тела, секреторных и гемолимфы.

Организм личинки на внедрение возбудителя отвечает за­щитной реакцией — фагоцитозом. Фагоциты захватывают и разрушают бацилл ларве, но это не обеспечивает полной защиты организма: размножение бацилл идёт острее, чем их фагоцитирование. Тичинки погибают, а их ткани подвергаются распаду. А. Тошков (1965) установил, что после гибели личинки размножение возбудителя в ней еще продолжается 10—12 ч, затем деление палочек прекращается и начинается процесс спорообразования, который заканчивается в течение 7—10 сут. В это время в трупе личинки образуются антибиотические вещества, препятствующие развитию посторонней микрофлоры.

Признаки болезни. Американский гнилец чаще проявляется во вторую,  наиболее жаркую половину Лета. Развитию этой болезни способствует перегревание пчелиного гнезда. В начале заболевания отмечают поражение   отдельных   личинок.   Со  временем число заболевших и погибших личинок увеличивается. Обнаружение вновь заболевших смесей происходит, как правило, с опозданием, особенно если пчеловод никогда не видел эту болезнь.

Признаки болезни обнаруживают во время осмотра сотов с расплодом. Заболевают обычно взрослые пчелиные личинки, уже запечатанные восковыми крышечками. Погибая и подвергаясь процессу разложения, они оседают ближе ко дну, на нижнюю боковую стенку ячейки, становятся вязкими, тягучими, напоминая полувысохшнй резиновый клей. Характерна для них в этот период тягучесть и липкость (рис. 6). Цвет пораженных личинок меняется от серовато-белого до кофейно-молочного и темно-серого.

Погибшие личинки имеют запах растопленного столярного клея. Восковые крышечки ячеек с погибшими личинками Западают, темнеют и продырявливаются. Вдавливание крышечек объясняется прилипанием головки личинок, которые, подсыхая, втягивают крышечки внутрь ячеек. Через 20—30 дней гнилостная масса высыхает в плотную корочку, крепко прилипшую к нижней восковой стенке ячейки. Удалить корочку пинцетом из ячейки, не разрушив ее стенок, не удается. Пчелы не могут очистить ячейки с погибшими личинками и новый расплод выводят рядом с этими ячейками. Поэтому расплод становится «пестрым», т. е. разброс среди здоровых личинок. Пчелы в больной семье становятся вялыми, с пониженной работоспособностью и преждевременно изнашиваются.

Количество молодых пчел резко сокращается или они полностью исчезают. Без оказания помощи сильно пораженные семьи пчел погибают в середине или конце лета. Часть больных семей погибает зимой или ранней весной вследствие того, что они идут в зимовку с недостаточным количеством пчел. При слабом заражении больные семьи могут перезимовать, но болезнь в них уже начинает проявляться с ранней весны. Эти ослабленные семьи легко подвергаются нападу пчел других семей.

Иммунитет. Взрослые пчелы обладают врожденным иммунитетом против американского гнильца. Существуют отдельные породы пчел, у которых расплод более устойчив к заболеванию американским гнильцом. Механизм высокой устойчивости, к гнильцу у этих семей объясняют по-разному: прежде всего способностью пчел в ранний период заболевания обнаружить ячейки с только что пораженными личинками (до их загнивания) и быстрой очисткой ячеек от них; способностью иммунных пчел профильтровывать мед от спор бациллы ларве при насасывании в медовый зобик инфицированного меда и при кормлении личи­нок; повышением у иммунных пчел фагоцитарной активности. Диагноз предварительный ставят по внешним призна­кам. При осмотре расплода учитывают его возраст, цвет, консистенцию и запах трупов личинок.

Необходимо исключить европейский  гнилец,  парагнилец, мешотчатый и порошковидный расплоды и варрооз.

Окончательный диагноз ставят на основании характерных знаков поражения расплода и результатов микроскопических, бактериологических и серологических исследований.

Профилактика. Предупреждение болезни — пчелиного расплода американским гнильцом достигается содержанием на пасеках сильных здоровых пчелиных семей, обеспеченностью их хорошей кормовой базой и строгим выполнением действующих веринарно-санитарных правил содержания пчел.

Поскольку в распространении болезни основную роль играют больные семьи и инфицированные продукты пчеловодства, особое внимание необходимо уделять охране благополучных пасек от заноса возбудителя извне; а также своевременному выявлению первых случаев заболевания. Необходимо осуществлять постоянный ветеринарный контроль за состоянием пчелиных семей, санитарным качеством продуктов пчеловодства и сырьем, избегать кормления пчел медом неизвестного происхождения.

Вновь поступивших в хозяйство пчел нужно содержать в течение 30 дней в карантине, а затем переводить на основную пасеку. Ограничивать кочевку неблагополучной пасеки, разрешая ее только на специально отведенных урочищах (при условии вывоза пчел с соблюдением мер, предупреждающих их вылет при транспортировке), удаленных на расстояние не менее 5—7 км от бпагополучных пасек.

Необходимо систематически собирать погибших пчел  на легковых площадках и сжигать их. На пасеках осуществлять противороевые меры, не допускать  содержания безматочных семей.

Меры борьбы. При установлении заболевания пчел американским гнильцом на населенный пункт, пасеку (точек) (территорию в радиусе 5—7 км накладывают карантин и осуществляют лечебные и ветеринарно-санитарные мероприятия в соответствии с действующей инструкцией.

При появлении первых случаев заболевания пчел американским гнильцом в благополучной местности (в районе), где эта болезнь ранее не регистрировалась, целесообразно немедленно уничтожить больные семьи. Их закуривают сернистым газом или формалином с соблюдением ветеринарно-санитарных правил и желательно дезинфицируют ульи, инвентарь, оборудование, парные помещения и территорию пасеки.

Необходимо учитывать, что полной ликвидации американского гнильца можно добиться лишь при осуществлении комплекса оздоровительных мероприятий: организационно-хозяйственных лечебных и дезинфекционных.

В настоящее время разработан комплексный метод оздоровления пчелиных семей.

Прежде  чем  приступить  к  проведению  дезинфекции  на пасеке, пчеловод и руководители хозяйств должны осуществить организационно-хозяйственные мероприятия, приобретать необходимое количество лечебных препаратов, закупать здоровых плодных маток.

Важное значение имеют текущая дезинфекция (перед перегоном пчел) и заключительная (перед снятием карантина). Их следует проводить особенно тщательно, чтобы полностью обезвредить все предметы, которые могут быть контаминированы возбудителем болезни. Пчеловоды обязаны тщательно соблюдать санитарные правила, тем более что пасечный инвентарь не закреплен за отдельными семьями, а общий для всей пасеки. Ветеринарно-санитарные мероприятия нужно проводить в присутствии ветеринарного работника.

Ульи, и их надставки, рамки и другие деревянные предметы от больных пчелиных семей тщательно механически очищают и обжигают огнем паяльной лампы до равномерного побурения или обрабатывают раствором, содержащим 10 % перекиси водорода и 3 % муравьиной или уксусной кислоты, из расчета 1 л на 1 м² (двенадцатирамочный улей) трехкратно с интервалом 1 ч. Через час после третьей обработки ульи можно использовать по назначению. Можно обработать теплым (30—40 °С) щелочным раствором формалина (5 % формальдегида и 5 % едкого натра) из расчета 0,5 л на 1 м ² двукратно с интервалом 1 ч. Через ч после обработки улей промывают водой и используют по значению. Соты и сушь — основной фактор распространения возбудителя американского гнильца. Их обеззараживают в недоступных для пчел помещениях. Для обработки используют 5 %-ный однохлорнстый йод или раствор, содержащий 3 % перекиси водорода и 3 % муравьиной или уксусной кислоты. Соты и сушь орошают раствором из гидропульта или машины ЛСД до полного заполнения ячеек с обеих сторон или погружением в раствор, выдерживают 24 ч, затем промывают водой, высушивают и используют. Перекись водорода не имеет запаха, хорошо отбеливает соты и способствует очищению их пчелами от остатков заплесневевшей перги в ячейках, фекалиев пчел и восковой моли. При использовании однохлористого йода для дезинфекции пчелы тоже хорошо очищают ячейки от загрязнений.

Дезинфекция сотов на пасеках — очень трудоемкий процесс. Большинство пчеловодов предпочитают дезинфицировать соты и сушь погружением их в емкости с дезинфицирующим раствором. Однако в этом случае раствор в некоторые ячейки не попадает; его не пускает воздух из-за большого поверхностного натяжения пленки дезинфицирующего раствора между краями ячейки сотов. Целесообразно рамки опрыскивать. Перед дезинфекцией с деревянных частей соторамок механическим путем удаляют прополис и фекалии пчел. Затем расставляют рамки в слегка наклонном положении на противнях в зимовнике или в пчеловодном домике и из гидропульта заполняют ячейки дезраствором поочередно с одной и с другой стороны. Соты ставят в вертикальном положении и выдерживают 24 ч, после этого дезинфицирующий раствор вытряхивают на противни.

Соты старые, черные, а также с пораженным расплодом не дезинфицируют. Их перетапливают на воск обычными способами (развариванием в воде, в паровой воскотопке). Воск тщательно: упаковывают в тару, маркируют «гнильцовое», указывают в ветеринарном свидетельстве (справке) адрес хозяйства, неблагополучные пасеки по американскому гнильцу и отправляют на технические  цели  или  на  воскозавод для обеззараживания.  При изготовлении вощины воск обеззараживают в автоклаве при температуре 127 °С в течение 2 ч. Мерву отправляют для переработки на воскоэкстракционный завод или сжигают.

Обеззараживание рамок без предварительной механической очистки от прополиса и других загрязнений достигается кипячением их в течение 15 мин в 2 %-ном растворе едкого натра или  в 4 %-ном растворе каустифицированной содопоташной смеси (каспос). После такой дезинфекции рамки полностью освобождаются от прополиса и надежно обеззараживаются.

Ульевые   холстики   можно   обеззаразить   кипячением   в 3 %-ном растворе кальцинированной соды в течение 30 мин.

Медогонки после завершения очередного откачивания меда тщателыю очищают от меда, промывают горячей водой, а затем дезинфицируют раствором, содержащим 5% формальдегида и 5 % едкого натра; экспозиция 5 ч. Расход раствора 1 л/м ² внутренней и наружной поверхности медогонки. По истечении экспозиции медогонку промывают горячей водой, удаляя остатки дезраствора со стенок и внутреннего оборудования, и просушивают на солнце. Воду после промывания медогонки и использованный дезраствор выливают в яму, недоступную для пчел.

Стамески, маточные клеточки, кормушки, цидилки и тару для меда, а также воскопрессы и воскотопки дезинфицируют по режимам, рекомендуемым для обеззараживания медогонок. Спецодежду пчеловодов кипятят в воде в течение часа или замачивают в 2 % -ном растворе формальдегида или параформа в течение 3 ч; 4 %-ном растворе формальдегида или параформа в течение 1 ч; 1 %-ном растворе хлорамина, активированном добавлением 1 % сернокислого или хлористого аммония, в течение 2ч.

Мелкий пчеловодный инвентарь и оборудование можно обеззараживать также следующим образом:

а)  погружают в 3 %-ный раствор перекиси водорода на 1 ч;

б)  кипятят в 0,5 %-ном растворе каустифицированной содопоташной смеси в течение 15 мин;

в)   кипятят в 3 %-ном растворе кальцинированной соды в течение 30 мин.

Территорию пасеки очищают и дезинфицируют (на глубину 5 см) в местах стоянки ульев одним из следующих препаратов: 4 %-ным раствором формальдегида при расходе 10 л/м² и экспозиции для черноземной почвы 10, супесчаной — 7 сут; хлорной известью (38 % активного хлора) из расчета 5 кг/м^г, которую перемешивают с почвой на глубину 5 см и затем смачивают водой (5 л/м²), экспозиция 10 сут.

На крупных пасеках все шире внедряется дезинфекция ульев, сотов, пчеловодного инвентаря и оборудования газом ОКЭБМ под покрытием из полиамидной пленки ПК-4.

После проведения дезинфекции составляют новые гнезда и организуют перегон больных пчелиных семей. Гнезда формируют путем подставки в продезинфицированные запасные ульи 4—8 продезинфицированных пустых соторамок (в зависимости от силы предназначенных для перегона семей) и 1—2 рамок с искусственной вощиной. При комплектовании пчелиных семей используют только продезинфицированные предметы — разделительные решетки, холстинки, кормушки и др.

В составленные гнезда перегоняют все больные пчелиные семьи. Это делают в конце дня при наличии медосбора. Пчел больной семьи стряхивают на лист бумаги, разостланный перед летком улья с составленным гнездом, и направляют их дымом в леток. Бумагу после перегона сжигают, ульи и соты больных семей убирают в недоступные для пчел помещения и дезинфицируют. При большом количестве здорового печатного расплода после перегона больных семей его выращивают в специально оставленных (одной или нескольких) семьях-изоляторах, для чего гнезда их освобождают от сотов без расплода и заполняют сотами с расплодом. Летки ульев семей-изоляторов зарешечивают мелкой сеткой, маток в этих семьях заменяют на здоровых плодных, пчел обеспечивают водой и лечебным сиропом. Через -15 дней молодых пчел перегоняют, как указано выше. В целях обеспечения большей эффективности лечения больных пчелиных семей предварительно в лаборатории определяют чувствительность выделенных штаммов возбудителя к антибиотикам и сульфаниламидным препаратам.

Больным пчелиным семьям дают лечебный корм, который готовят из сахарного сиропа (1 часть сахара на 1 часть воды) добавлением на 1 л сахарного сиропа одного из следующих препаратов: норсульфазол натрия—1—2 г; неомицина, тетрапина,  эритромицина,  окситетрациклина,   мономицина— по 1 тыс. ЕД; стрептомицина — 500 тыс., канамицина — 400 тыс. ЕД. Сначала готовят водный раствор лечебного препарата. Для этого необходимое количество сульфаниламидного препарата или антибиотика  (таблетки измельчают в порошок)  растворяют в 1 мл теплой кипяченой воды (38—40 °С) и тщательно размешивают. Затем полученный раствор препарата смешивают с 1 л теплого сахарного сиропа и в конце дня дают пчелам в чистых кормушках по 100—150 мл на улочку через каждые 5—7 дней до полного выздоровления. Слабым семьям лечебный сироп вносят из гидропульта непосредственно в ячейки сотов, так как такие семьи не в состоянии выбрать из кормушек лечебную его дозу.. В случае нового возникновения болезни ранее применявшийся лекарственный препарат заменяют другим по рекомендации ветеринарной лаборатории.

Пасеки, неблагополучные по американскому гнильцу, можно быстро оздоровить при проведении на них комплексного метода оздоровления. Если применяют только одни лечебные препараты без дезинфекции, перегона, замены инфицированных меда и перги на сахарный сироп с лечебным препаратом, часто даже после трехкратной лечебной обработки пасека остается неблагополуч­ий или болезнь появляется снова через некоторое время в этом ну или в следующем летнем сезоне. Условно здоровые семьи, т. е. такие семьи, которые не имеют видимых признаков гнильца,  находятся на неблагополучной по этой болезни пасеке, а также семьи пасек, расположенных по соседству с неблагополучными (в радиусе 3 км), лечат так же, как и больные семьи, но не перегоняют. После оздоровления пчелиных семей гнезда их расширяют сотами вощины или продезинфицированными и полученными от здоровых семей сушью и медо-перговыми сотами. Гнездовые соты более 2 лет использования перетапливают на воск. Пасеку  считают оздоровленной  и снимают  карантин по истечении года после ликвидации болезни при условии проведения очистки и заключительной дезинфекции ульев, пчеловодного инвентаря, помещений, территории пасеки. Мед хранят в плотно закрытой посуде и реализуют только для пищевых целей.  Использование его для подкормки пчел запрещается.